Požiadavky na odber vzoriek, skladovanie a prepravu pre bežné experimenty

Požiadavky na odber vzoriek, skladovanie a prepravu pre bežné experimenty

1. Odber a uchovávanie patologických vzoriek:

☛Zmrazená časť: Odstráňte vhodné tkanivové bloky a uložte ich do tekutého dusíka;

☛Parafínové rezy: Odstráňte vhodné bloky tkaniva a uložte ich do 4% paraformaldehydu;

☛Bunkové sklíčka: Bunkové sklíčka boli fixované v 4% paraformaldehyde počas 30 minút, potom nahradené PBS a ponorené do PBS a skladované pri 4 °C.

2. Odber a uchovávanie vzoriek molekulárnej biológie:

☛Čerstvé tkanivo: Odrežte vzorku a uskladnite ju v tekutom dusíku alebo v chladničke -80°C;

☛Parafínové vzorky: Skladujte pri izbovej teplote;

☛Vzorka plnej krvi: Odoberte primerané množstvo plnej krvi a pridajte EDTA alebo heparínovú antikoagulačnú skúmavku na odber krvi;

☛Vzorky telesných tekutín: vysokorýchlostná centrifugácia na zber sedimentu;

☛Vzorky buniek: Bunky sa lyzujú pomocou TRizolu a uchovávajú sa v tekutom dusíku alebo v chladničke pri teplote -80 °C.

3. Odber a skladovanie proteínových experimentálnych vzoriek:

☛Čerstvé tkanivo: Odrežte vzorku a uskladnite ju v tekutom dusíku alebo v chladničke -80°C;

☛Vzorka plnej krvi: Odoberte primerané množstvo plnej krvi a pridajte EDTA alebo heparínovú antikoagulačnú skúmavku na odber krvi;

☛Vzorky buniek: Bunky sa úplne lyzujú roztokom na lýzu buniek a potom sa uchovávajú v tekutom dusíku alebo v chladničke pri teplote -80 °C.

4. Odber a skladovanie ELISA, rádioimunoanalýzy a biochemických experimentálnych vzoriek:

☛Vzorka séra (plazmy): Odoberte plnú krv a pridajte ju do prokoagulačnej skúmavky (antikoagulačnej skúmavky), centrifugujte pri 2500 otáčkach za minútu asi 20 minút, odoberte supernatant a uložte do tekutého dusíka alebo do chladničky -80°C;

☛Vzorka moču: centrifugujte vzorku pri 2500 otáčkach za minútu asi 20 minút a uložte ju do tekutého dusíka alebo do chladničky -80°C;pozri túto metódu pre hrudnú a ascitovú tekutinu, cerebrospinálnu tekutinu a tekutinu z alveolárnej laváže;

☛Vzorky buniek: Pri detekcii vylučovaných zložiek centrifugujte vzorky pri 2500 otáčkach za minútu asi 20 minút a skladujte ich v tekutom dusíku alebo v chladničke -80°C;pri detekcii intracelulárnych zložiek zrieďte bunkovú suspenziu PBS a opakovane zmrazujte a rozmrazujte, aby sa bunky zničili a uvoľnili sa intracelulárne zložky.Centrifugujte pri 2500 ot./min. počas približne 20 minút a zbierajte supernatant ako je uvedené vyššie;

☛Vzorky tkaniva: Po odrezaní vzorky ich odvážte a zmrazte v tekutom dusíku alebo v chladničke -80°C na neskoršie použitie.

5. Zbierka vzoriek metabolomiky:

☛Vzorka moču: Odstreďte vzorku pri 2500 otáčkach za minútu asi 20 minút a skladujte ju v tekutom dusíku alebo v chladničke -80°C;pozri túto metódu pre hrudnú a ascitovú tekutinu, cerebrospinálnu tekutinu, tekutinu z alveolárnej laváže atď.;

☛Po rozrezaní vzorku tkaniva ju odvážte a zmrazte v tekutom dusíku alebo v chladničke -80°C na neskoršie použitie;