Polymerázová reťazová reakcia, skrátenePCRv angličtine je technika molekulárnej biológie používaná na amplifikáciu špecifických fragmentov DNA.Možno to považovať za špeciálnu replikáciu DNA mimo tela, ktorá môže výrazne zvýšiť veľmi malé množstvo DNA.Počas celéhoPCRV procese reakcie hrá dôležitú úlohu jedna trieda látok – enzýmy.
1. Taq DNA
Pri pokusoch v prvých dňoch rPCR, vedci použili Escherichia coli DNA polymerázu I, Ale s týmto enzýmom je problém: potrebuje doplniť nový enzým zakaždým, keď sa vykoná cyklus, čo trochu komplikuje kroky operácie a je ťažké ho úplne automaticky zosilniť.Tento problém bol vyriešený po tom, čo vedci náhodne izolovali Taq DNA polymerázu z Thermus aquaticus v roku 1988. Odvtedy sa automatická amplifikácia DNA stala realitou.Objav tohto enzýmu tiež robíPCRtechnológia pohodlná, praktická a univerzálna technológia.V súčasnosti je Taq DNA polymeráza najbežnejšou polymerázou v súpravách DNA.
2. PfuDNA
Ako už bolo spomenuté vyššie, Taq DNase má veľkú chybu, takže vedci do určitej miery modifikovali Taq DNA polymerázu, aby sa vyhli nešpecifickej amplifikácii v dôsledku nesúladu, čo má za následok nepresné výsledky testov.Ale modifikácia Taq DNA polymerázy môže inhibovať aktivitu DNA polymerázy pri izbovej teplote.PfuDNA polymeráza môže dobre kompenzovať vyššie uvedené nevýhody Taq DNA polymerázy, takže PCR reakcia môže prebiehať normálne a úspešnosť amplifikácie cieľového génu sa môže účinne zlepšiť.
3. Reverzná transkriptáza
Reverzná transkriptáza bola objavená v roku 1970. Tento enzým využíva RNA ako templát, dNTP ako substrát, riadi sa princípom párovania báz a syntetizuje jednovláknové DNA komplementárne k templátu RNA v smere 5′-3′.Reverzná transkriptáza je primárne závislá od aktivity DNA polymerázy z templátov DNA alebo RNA, a preto nemá žiadnu 3'-5' exonukleázovú aktivitu.Má však aktivitu RNázy H, ktorá do určitej miery obmedzuje dĺžku syntézy reverznej transkriptázy.Kvôli nízkej vernosti a termostabilite divokej reverznej transkriptázy ju vedci aj upravili.
PrePCRExperimenty, hlavným spotrebným materiálom sú: individuálna PCR skúmavka, 4/8-prúžková PCR skúmavka, PCR platne.
LabiovoPCR spotrebný materiálmať nasledovnévýhod:
PCR platne: Široká kompatibilita tepelného cyklovača;Vysoký kontrast, ľahká identifikácia;dobre fluorescenčný odraz;dobrýprenos tepla;Certifikované inhibítory DNázy, RNázy, DNA, PCR a testované bez pyrogénov.
Jednotlivé skúmavky PCR: Odolný voči odparovaniu, dobrýprenos tepla;vynikajúca optická čistota; certifikovaná DNáza, RNáza, DNA, inhibítory PCR a testované bez pyrogénov.
PCR skúmavky so 4/8 prúžkami: Ultratenké steny; vysoká čistota; dobrý odraz fluorescencie;možno použiť vo farmaceutickom priemysle, potravinárstve a molekulárnej biológii; vysoko kvalitný, panenský PP materiál; certifikované DNázy, RNázy, DNA, PCR inhibítory a testované bez pyrogénov.
Čas odoslania: jún-09-2023